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醫(yī)學(xué)檢測(cè)PCR實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)規(guī)范

  • Jason Peng

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  • 2022-06-22  |  Visits:


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自新型冠狀病毒肺炎爆發(fā)以來(lái),各省市都在規(guī)范疫情防控,人們?cè)絹?lái)越熟悉核酸檢測(cè)一詞。說(shuō)到核酸檢測(cè),我們必須提到移動(dòng)式核酸檢測(cè)工作站-PCR艙實(shí)驗(yàn)室。

一.PCR實(shí)驗(yàn)室試劑儲(chǔ)存和準(zhǔn)備區(qū)操作規(guī)范

PCR實(shí)驗(yàn)室試劑儲(chǔ)存和準(zhǔn)備區(qū)操作規(guī)范
實(shí)驗(yàn)區(qū)的主要操作是儲(chǔ)存試劑的制備、試劑的分包裝和主反應(yīng)混合物的制備。用于標(biāo)本生產(chǎn)的試劑和材料應(yīng)直接運(yùn)輸?shù)皆搮^(qū)域,不得通過(guò)其他區(qū)域。試劑原料必須儲(chǔ)存在該區(qū)域,并制備所需的儲(chǔ)存試劑。這個(gè)區(qū)域?qū)饬鲏毫Φ目刂茮](méi)有嚴(yán)格的要求。該地區(qū)的主要操作是保存臨床標(biāo)本和核酸(RNA、DNA)提取、存儲(chǔ)和添加到擴(kuò)增反應(yīng)管和測(cè)定RNA時(shí)cDNA的合成。區(qū)域的壓力梯度要求為:相對(duì)于相鄰區(qū)域的正壓,以避免從相鄰區(qū)域進(jìn)入該區(qū)域的氣溶膠污染。此外,由于在樣品添加過(guò)程中可能會(huì)發(fā)生氣溶膠污染,因此應(yīng)避免在該區(qū)域不必要的行走。

PCR實(shí)驗(yàn)室效果圖 PCR實(shí)驗(yàn)室效果圖
   

二.PCR實(shí)驗(yàn)室制備和擴(kuò)增區(qū)域操作規(guī)范

PCR實(shí)驗(yàn)室制備和擴(kuò)增區(qū)域操作規(guī)范
這個(gè)區(qū)域的主要操作是DNA或cDNA擴(kuò)大。此外,已制備的DNA合成模板cDNA(來(lái)自樣品制備區(qū))添加和主反應(yīng)混合物(來(lái)自試劑儲(chǔ)存和制備區(qū))制備反應(yīng)混合物也可在本區(qū)進(jìn)行。PCR在測(cè)量中,反應(yīng)管通常必須在第一輪擴(kuò)增后打開(kāi),因此巢式擴(kuò)增具有較高的污染風(fēng)險(xiǎn),第二次加樣必須在該區(qū)域進(jìn)行。
區(qū)域的壓力梯度要求為:相對(duì)于相鄰區(qū)域的負(fù)壓,以避免氣溶膠從該區(qū)域泄漏。為了避免氣溶膠造成的污染,應(yīng)盡量減少該區(qū)域不必要的行走。應(yīng)在超凈平臺(tái)上進(jìn)行添加樣品等個(gè)人操作。

PCR實(shí)驗(yàn)室效果圖 PCR實(shí)驗(yàn)室效果圖
   

三.PCR實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化設(shè)置和管理

PCR實(shí)驗(yàn)室工作規(guī)范制度
一般應(yīng)包括以下文件:實(shí)驗(yàn)室設(shè)置、布局和組織結(jié)構(gòu)、實(shí)驗(yàn)室內(nèi)部管理系統(tǒng)、實(shí)驗(yàn)室人員配置和管理系統(tǒng)、生物保護(hù)和安全系統(tǒng)、實(shí)驗(yàn)室廢物處理系統(tǒng)、實(shí)驗(yàn)室清潔消毒系統(tǒng)、儀器設(shè)備管理系統(tǒng)、儀器、試劑、耗材采購(gòu)程序和管理系統(tǒng)、臨床標(biāo)本管理系統(tǒng)、實(shí)驗(yàn)室記錄管理系統(tǒng)、質(zhì)量控制管理系統(tǒng)、結(jié)果報(bào)告管理系統(tǒng)、投訴內(nèi)部處理系統(tǒng)、負(fù)責(zé)人、質(zhì)檢員職責(zé)、崗位設(shè)置、責(zé)任制度等……
標(biāo)準(zhǔn)操作程序
一般包括:消毒劑制備標(biāo)準(zhǔn)操作程序:消毒標(biāo)準(zhǔn)操作程序;超凈工作臺(tái)采用標(biāo)準(zhǔn)操作程序;超凈工作臺(tái)維護(hù)標(biāo)準(zhǔn)操作文件;PCR使用標(biāo)準(zhǔn)操作程序;PCR儀器維護(hù)和維護(hù)標(biāo)準(zhǔn)操作程序;高速低溫離心機(jī)使用標(biāo)準(zhǔn)操作程序;液體轉(zhuǎn)移器使用標(biāo)準(zhǔn)操作程序;冰箱維護(hù)和維護(hù)標(biāo)準(zhǔn)操作程序;電熱恒溫浴箱操作程序;電子平衡使用和糾正操作程序;移動(dòng)紫外線消毒車(chē)輛使用操作程序;加樣器校準(zhǔn)標(biāo)準(zhǔn)操作程序;離心機(jī)維護(hù)操作程序;溫度計(jì)校準(zhǔn)程序;試劑質(zhì)量檢驗(yàn)操作程序;標(biāo)本標(biāo)識(shí)編號(hào)編制規(guī)則;臨床標(biāo)本的采集和處理操作程序;臨床標(biāo)本的保存程序;乙型肝炎病毒核酸擴(kuò)增熒光檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)操作程序;丙型肝炎病毒核酸擴(kuò)增熒光檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)操作程序;結(jié)核分枝桿菌核酸擴(kuò)增熒光檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)操作程序;沙眼衣原體核酸擴(kuò)增熒光檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)操作程序等……

PCR實(shí)驗(yàn)室效果圖 PCR實(shí)驗(yàn)室效果圖
   

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